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接下來幾天,吳哲就埋頭進了實驗室裡。開心網路這邊本來兩天後就要舉行拍賣會的,可國內的一些投資機構紛紛要求把拍賣會安排在了元旦前一天,讓他們可以有更多的時間能籌集資金。郭子宜在請示了吳哲後,也同意了這一要求。
吳哲沒怎麼放心上,他這邊終於是把程式給搞了出來,然後把程式丟給了鄭義仲。讓他不停地輸入前面的實驗資料,檢驗正確率。
而他則開始穿著無菌服在實驗室裡面做起了Sanger測序。他被唐夢帶著做了兩次後,就能自己獨立操作了。
先利用DNA聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。
每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成,每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dNTP),並混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)。由於ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基團,使延長的寡聚核苷酸選擇性地在G、A、T或C處終止。
終止點由反應中相應的雙脫氧而定。每一種dNTPs和ddNTPs的相對濃度可以調整,使反應得到一組長几百至幾千鹼基的鏈終止產物。
它們具有共同的起始點,但終止在不同的核苷酸上,可透過高解析度變性凝膠電泳分離大小不同的片段,凝膠處理後可用X-光膠片放射自顯影進行檢測。
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